SVEA C4液相色譜柱主要是由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
SVEA C4液相色譜柱的分類及應用范圍:
分類方法很多,可按鍵合相類型、用途、基質種類等進行分類。
1、硅膠基質柱(4大類)
目前,分析型SVEA C4液相色譜柱多為硅膠基質柱,細分為:
a、高純硅膠柱:以高純度硅烷化硅膠(Silica)為填料,應用范圍較廣,但只能在PH2.0-7.5,小于60度的條件下使用。又由于強極性硅羥基(Si-OH)的次級保留效應較強,所以應用受到局限,已被鍵合相柱所取代。
b、反相硅膠柱:是以硅烷化硅膠為基質,表面鍵合弱極性官能團的固定相。目前多用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5等。用于分離大多數有機化合物,應用范圍*。
c、正相硅膠柱:是以硅烷化硅膠為基質,表面鍵合極性官能團的固定相。目前較多的為:NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL。多用于分離光學異構體和反相柱子不能分離的極性比較大的物質。
d、離子交換柱:是以硅烷化硅膠為基質,以磺化交聯鍵合強陽/陰離子基團的固定相,又分為強酸性、強堿性、弱酸性、弱堿性等不同規格。用于分離解離性較強的有機鹽類化合物。
2、聚合物基質柱:
聚合物基質柱是指采用聚苯乙烯—二乙烯基苯、聚甲基丙烯酸脂、多孔性微球蛋白等聚合物凝膠作為主要填料的一類色譜柱。其相對于硅膠柱具有更強的疏水性及更寬泛的pH范圍(1.0~14.0),但柱效較低,目前主要應用于凝膠滲透色譜、凝膠過濾色譜及分子排阻色譜。主要用于分離蛋白質類等大分子化合物。