Fortis C18 色譜柱是常用、每個實驗室都有的通用型色譜柱。填料是硅膠基質上鍵合十八烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質。隨著每家色譜柱制造商的研發,C18柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來的2~8,發展到現在1~14,與純水相的兼容性越來越好,某些色譜柱即使長時間使用100%水相,也不會發生填料疏水塌陷。對于每位實驗人員來說,可供選擇的范圍日趨廣泛。
它的選用基本原則:
1、選用經過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現象。
2、選用含碳量高的柱子,增加保留值。
3、選用較短的柱子(如15cm,7.5cm)。
4、選用小顆粒度的填料。
5、對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
C18柱的規格對Fortis C18 色譜柱的影響
柱填料的選擇關系到色譜分離的可能性,而柱規格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。
柱規格包括兩方面:柱內徑和柱長度。柱內徑,分析型一般為2~6mm,制備型20mm,大者可達80mm;柱長度,分析型5~30cm,制備型15~50cm。
一般來說,柱內徑不影響分離度與分析時間的關系。今天,柱技術已發展到不同柱內徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內徑的柱子又各具特點,對相同的分析時間和分離度來說,內徑大的柱子比內徑小的柱子多消耗溶劑。另一方面,較小內徑的柱子對相同的檢測信號來說所需樣品量亦較少。
因此,在樣品量有限的時候,可使用小內徑柱。柱長度增加雖可改善分離效果,但阻力也隨之增加,必須提高入口壓力。柱壓是同時影響增加分離度和減少分析時間的主要障礙。分離度、分析時間及柱壓三者相互制約,選擇好其中兩者,則第3個因素也就選好了。長柱可以給出高分離度,短柱可提供快速分離,我們可以根據樣品情況去選用合適的色譜柱。